Để tổng hợp một phân tử glucose trong pha tối, thực vật C₄ cần nhiều ATP hơn so với thực vật C₃ vì: Ở thực vật C₃, pha cố định CO₂ chỉ diễn ra theo chu trình Calvin và cần 18 ATP để tổng hợp một phân tử glucose. Ở thực vật C₄, ngoài tiêu tốn 18 ATP trong chu trình Calvin còn cần thêm 6 ATP trong chu trình C₄ để hoạt hoá tái tạo PEP.