Phương pháp lên men giấm được thực hiện trong điều kiện thoáng khí, nhiệt độ khoảng 20 ^oC – 30 ^oC. Do quá trình lên men giấm là lên men hiếu khí.

Phương trình hoá học: CH₃CH₂OH + O₂ →men, 200-300 CCH₃COOH + H₂O.

Ứng dụng trong thực tiễn của phương pháp này là để sản xuất giấm ăn do phương pháp này dễ thực hiện, sản phẩm có mùi thơm đặc trưng tuy nhiên thời gian thực hiện thường kéo dài và acetic acid thu được có nồng độ thấp.